Vědecká metoda pro kvantifikaci NMN v biologických vzorcích
1. Úvod
Suplementacenikotinamid mononukleotid (NMN)aby se zvýšila regulaceúroveňznikotinamidadenindinukleotid (NAD +)bylo odhaleno jako slibná intervence proti stárnutí. Stále je všakvážná výzva pro přesnékvantifikovat meziprodukty NAD+, MODERÁTOR zejména. Cílem této studie je představit novou metodu, dvojitě izotopově zprostředkovanou metodiku LC-MS/MS (DIMELC-MS/MS), pro přesnou kvantifikaciMODERÁTOR v biologických vzorcích.2. Faktory ovlivňující přesnou detekci NMN
NMN je obtížné přesně detekovat kvůli jeho zranitelnosti vůči enzymatickým látkámdegradace, konverze při zpracování vzorku, jeho komplexní chování v různých kolonách a podmínkách extrakce, jakož i matricový efekt.Konkrétně NMN má vlastnosti vysoké polarity a nízké těkavosti, která se snadno rozpouští ve vodě, ale obtížně se rozpouští v organických rozpouštědlech. Tyto vlastnosti značně omezují použití mnoha konvenčních metod kvantitativní analýzy.
BIologické vzorkynapříkladkrev nese významné aktivity CD38 a CD73 (ecto-5'-nukleotidáza), z nichž oba by mohly používat NMN jako substrát.
Chování NMN v koloně je velmi složité, pravděpodobně kvůli bipartitní povaze jeho nábojů, takže jemné rozdíly v podmínkách extrakce a kolony významně ovlivňují spolehlivou a přesnou detekci NMN.
3. Strategie zvládánídimeLC-MS/MSsnížit dopad impakt faktorů
Aby se zabránilo interferenci výše uvedených faktorů, prototypiesloupecNMN-2je použito. Tento sloupecobsahovatsVysoce čisté částice oxidu křemičitého na bázi C18které jsou schopnější vázat hydrofilní sloučeniny než uhlíkové částice, což zlepšuje schopnost separace.Pkyselina erchlorová (PCA)je zaměstnán, protože můžeúčinně extrahovat NAD + a NMN z biologických vzorků, jako je plazma, s minimálním ztráty.
Chcete-li upravit maticové efekty,apevné množství (1 μM) každého izotopová sloučeninajás přidáno dobiologickývzorky před extrakcí PCA.
4. VýhodasdimeLC-MS/MS
Dvlastní izotopové standardy NMN, NMN (M + 14) a NMN (M + 5) v metodice řízené LC-MS/MS mohou přesně sledovat osud NMN během zpracování vzorkukterývýrazně zvyšuje přesnost a spolehlivost měření NMN v biologických vzorcích. Kromě toho může dimeLC-MS/MS vyhodnotit účinnost extrakce a absolutní koncentrace NMN v různých typech biologických vzorků.5. Závěr
Thjenové LC-MS/MS-řízená metodika s dvojitými izotopovými standardy NMN konevAccuraTo je důvod, proč jsem sea reliabLyměřit NMN v biologických vzorcích. Může být použit pro budoucí studie o příjmu NMN.6. Odkaz
Unno, Junya et al. "Absolutní kvantifikace nikotinamidového mononukleotidu v biologických vzorcích pomocí kapalinové chromatografie zprostředkované dvojitými izotopy-tandemová hmotnostní spektrometrie (dimeLC-MS/MS)." npj stárnutí sv. 10,1 2. 2. ledna 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Proč si vybratBONTAC?
BONTACje lídrem globálníhoMODERÁTORprůmysl. Máme první technologii celoenzymové katalýzy v Číně a stali jsme se předním podnikem v oblasti koenzymové produkty, které jsou široce používány ve zdravotnictví, lékařství a kosmetice,zelené zemědělství, biomedicína a další obory.PozoruhodněBONTAC je MODERÁTORdodavatel surovin slavného týmu Davida Sinclaira na Harvardově univerzitě. Naše služby a produkty jsou důvěryhodné. MimotoBONTACmánezávisléhokoenzym Výzkumné centrum strojírenské technologie na provinční úrovni v Číně a vlastní továrny, kde lze zajistit čistotu a stabilitu výrobků.