Vědecká metoda pro kvantifikaci NMN v biologických vzorcích
1. Úvod
DoplněníMononukleotid nikotinamidu (NMN)zvýšit regulaciúroveň zNikotinamidadenindinukleotid (NAD+)byla představena jako slibná anti-aging intervence. Přesto je to stále vážná výzva k přesnémukvantifikujte meziprodukty NAD+, NMN Konkrétně. Tato studie má za cíl zavést novou metodu, dvojitě izotopově zprostředkovanou metodologii LC-MS/MS (DIMELC-MS/MS), pro přesnou kvantifikaciNMN v biologických vzorcích.2. Faktory ovlivňující přesnou detekci NMN
NMN je obtížné přesně detekovat kvůli své zranitelnosti vůči enzymatickým vlivůmdegradace, přeměna při zpracování vzorků, jeho složité chování v různých podmínkách kolony a extrakce, stejně jako efekt matice.
Konkrétně má NMN vlastnosti vysoké polarity a nízké volatility, což se snadno rozpouští ve vodě, ale obtížně rozpustí v organických rozpouštědlech. Tyto vlastnosti výrazně omezují použití mnoha konvenčních metod kvantitativní analýzy.
BJologické vzorkynapříklad krev nese významné aktivity CD38 a CD73 (ekto-5’-nukleotidáza), z nichž oba by mohly využívat NMN jako substrát.
Chování NMN ve koloně je velmi složité, pravděpodobně kvůli bipartitní povaze jeho nábojů, takže jemné rozdíly v extrakci a podmínkách kolony významně ovlivňují spolehlivou a přesnou detekci NMN.
3. Strategie zvládánídimeLC-MS/MS Snížení dopadu impakt faktorů
Aby se zabránilo interferenci výše uvedených faktorů, je pRototypsloupecNMN-2 je aplikováno. Tento sloupekobsahovats Vysoce čisté křemičité částice na bázi C18 které jsou schopnější vázat hydrofilní sloučeniny než uhlíkové částice, což zlepšuje schopnost separace.PKyselina erchlorová (PCA) je využíván, protože může efektivně extrahujte NAD+ a NMN z biologických vzorků, jako je plazma, s minimálním ztráty.
Pro úpravu efektů matice,a Pevně stanovené množství (1 μM) každého z nich Izotopová sloučeninais přidáno kbiologické vzorky před extrakcí PCA.
4. Výhodas dimeLC-MS/MS
Double izotopové NMN standardy, NMN (M + 14) a NMN (M + 5) v metodologii řízené LC-MS/MS mohou přesně sledovat osud NMN během zpracování vzorků, kterévýrazně zvyšuje přesnost a spolehlivost měření NMN v biologických vzorcích. Kromě toho může dimeLC-MS/MS vyhodnotit účinnost extrakce a absolutní koncentrace NMN v různých typech biologických vzorků.
5. Závěr
Thje nové LC-MS/MS-řízená metodologie s dvojitými izotopovými NMN standardy může accurately a Reliably změřit NMN v biologických vzorcích. Může být použit pro budoucí studie příjmu NMN.6. Reference
Unno, Junya et al. "Absolutní kvantifikace mononukleotidu nikotinamidu v biologických vzorcích pomocí dvojité izotopově zprostředkované kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií (dimeLC-MS/MS)." NPJ stárnutí, sv. 10,1 2. 2. ledna 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Proč si vybratBONTAC?
BONTACje lídrem globálníhoNMNprůmysl. Máme první technologii katalyzy celých enzymů v Číně a stali jsme se vedoucím podnikem v oblasti Koenzymové produkty, které jsou široce využívány ve zdravotnictví, medicíně a kosmetice, zelené zemědělství, biomedicína a další obory. Významně,BONTAC je NMNDodavatel surovin slavného týmu Davida Sinclaira na Harvardově univerzitě. Naše služby a produkty jsou důvěryhodné. Dále,BONTACmánezávislýKoenzym Výzkumné centrum inženýrské technologie na provinční úrovni v Číně a továrny ve vlastních vlastnictvích, kde lze zajistit čistotu a stabilitu produktů.
