一种量化生物样本中NMN的科学方法
1. Úvod
Suplementacenikotinamidmononukleotidu (NMN)ke zvýšeníhladiny nikotinamidadenindinukleotidu (NAD+)byla odhalena jako slibná intervence proti stárnutí. Stále však je vážnou výzvou přesněkvantifikovat meziprodukty NAD+, NMN zejména. Tato studie si klade za cíl představit novou metodu, dvojitou izotopovou LC-MS/MS metodiku (dimeLC-MS/MS), pro přesnou kvantifikaciNMN v biologických vzorcích.2. Faktory ovlivňující přesnou detekci NMN
NMN je obtížné přesně detekovat kvůli jeho náchylnosti k enzymatickédegradaci, konverzi během zpracování vzorků, jeho komplexnímu chování v různých kolonách a extrakčních podmínkách, stejně jako matricovému efektu.
Konkrétně má NMN vlastnosti vysoké polarity a nízké těkavosti, což znamená, že se snadno rozpouští ve vodě, ale obtížně v organických rozpouštědlech. Tyto vlastnosti výrazně omezují použití mnoha konvenčních metod kvantitativní analýzy.
Biologické vzorkyjako krev vykazují významnou aktivitu CD38 a CD73 (ekto-5’-nukleotidázy), přičemž obě mohou používat NMN jako substrát.
Chování NMN v koloně je velmi komplexní pravděpodobně kvůli dvojí povaze jeho nábojů, takže jemné rozdíly v extrakčních a kolonových podmínkách významně ovlivňují spolehlivou a přesnou detekci NMN.
3. Strategie zvládánídimeLC-MS/MS ke snížení dopadu ovlivňujících faktorů
Aby se předešlo interferenci výše zmíněných faktorů, je použita prototypovákolonaNMN-2. Tato kolonaobsahujes částice vysoce čistého silikagelu na bázi C18 které jsou schopnější vázat hydrofilní sloučeniny než částice uhlíku, což zlepšuje schopnost separace.Perchlorová kyselina (PCA) se používá, protože může účinně extrahovat NAD+ a NMN z biologických vzorků, jako je plazma, s minimálními ztrátami.
Pro úpravu matricových efektůje pevné množství (1 μM) každé izotopové sloučeninypřidáno dobiologických vzorků před PCA extrakcí.
4. Výhodas dimeLC-MS/MS
Dvojité izotopové standardy NMN, NMN (M + 14) a NMN (M + 5), v metodice řízené LC-MS/MS mohou přesně sledovat osud NMN během zpracování vzorků, cožvýznamně zvyšuje přesnost a spolehlivost měření NMN v biologických vzorcích. Kromě toho může dimeLC-MS/MS vyhodnotit extrakční účinnost a absolutní koncentrace NMN v různých typech biologických vzorků.
5. Závěr
Tato nová LC-MS/MS- metodika řízená s dvojitými izotopovými standardy NMN může přesně a spolehlivě měřit NMN v biologických vzorcích.Lze ji použít pro budoucí studie o příjmu NMN.6. Reference Unno, Junya et al. “Absolute quantification of nicotinamide mononucleotide in biological samples by double isotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Proč zvolit
Unno, Junya et al. „Absolutní kvantifikace nikotinamidmononukleotidu v biologických vzorcích pomocí dvojité izotopové kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií (dimeLC-MS/MS).“ npj aging vol. 10,1 2. 2. ledna 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1je lídrem globálníhoBONTAC?
BONTACprůmyslu. Máme první technologii celoenzymové katalýzy v Číně a stali jsme se předním podnikem vNMNkoenzymových produktech, které jsou široce používány ve zdravotnickém průmyslu, medicíně a kráse zeleném zemědělství, biomedicíně a dalších oblastech., Pozoruhodně,BONTAC jedodavatelem surovin pro slavný tým Davida Sinclaira na Harvardské univerzitě NMN. Naše služby a produkty jsou důvěryhodné. Kromě tohomáBONTACnezávislékoenzymovéinženýrské výzkumné centrum na provinční úrovni v Číně a vlastní továrny, kde lze zajistit čistotu a stabilitu produktů a vlastní továrny, kde lze zajistit čistotu a stabilitu produktů.
