Vědecká metoda kvantifikace NMN v biologických vzorcích
1. Úvod
Doplnění nikotinamidový mononukleotid (NMN) pro zvýšení hladiny nikotinamidadenindinukleotidu (NAD+) byl představen jako slibný zásah proti stárnutí. Stále je však vážnou výzvou přesně kvantifikovat meziprodukty NAD+, NMN zejména. Tato studie je poháněna zavedením nové metody, metodiky LC-MS/MS zprostředkované dvojitými izotopy (dimeLC-MS/MS), pro přesnou kvantifikaci NMN v biologických vzorcích.
2. Faktory ovlivňující přesnou detekci NMN
NMN je obtížné přesně detekovat kvůli jeho zranitelnosti vůči enzymatické degradaci, konverzi při zpracování vzorků, jeho složitému chování v různých podmínkách kolony a extrakce a také kvůli maticovému efektu.
Konkrétně NMN má vlastnosti vysoké polarity a nízké těkavosti, která se snadno rozpouští ve vodě, ale obtížně se rozpouští v organických rozpouštědlech. Tyto vlastnosti značně omezují použití mnoha konvenčních metod kvantitativní analýzy.
Biologické vzorky napříkladkrev nese významné aktivity CD38 a CD73 (ecto-5’-nukleotidas), z nichž oba by mohly používat NMN jako substrát.
Chování NMN v koloně je velmi složité, pravděpodobně kvůli bipartitní povaze jeho nábojů, takže jemné rozdíly v extrakci a podmínkách kolony významně ovlivňují spolehlivou a přesnou detekci NMN.
3. Strategie zvládání dimLC-MS/MSsnížit dopad impakt faktorů
Aby se zabránilo ovlivňování výše uvedených faktorů, je aplikován prototypový sloupec NMN-2. Tato kolona obsahuje vysoce čisté částice oxidu křemičitého na bázi C18, které jsou schopnější vázat hydrofilní sloučeniny než uhlíkové částice, což zlepšuje schopnost separace.
Kyselina chloristá (PCA) se používá, protože dokáže účinně extrahovat NAD+ a NMN z biologických vzorků, jako je plazma, s minimálními ztrátami.
Pro úpravu účinků matrice se do biologických vzorků před extrakcí PCA přidá pevné množství (1 μM) každé izotopové sloučeniny.
4. Výhodasz dimLC-MS/MS
Dvojité izotopové standardy NMN, NMN (M + 14) a NMN (M + 5), mohou v metodice řízené LC-MS/MS-driven přesně sledovat osud NMN během zpracování vzorku, což výrazně zvyšuje přesnost a spolehlivost měření NMN v biologických vzorcích. Kromě toho může dimeLC-MS/MS vyhodnotit účinnost extrakce a absolutní koncentrace NMN v různých typech biologických vzorků.
5. Závěr
Thjenový LC-MS/MS-řízená metodika s dvojitými izotopovými standardy NMN dokáže přesně a spolehlivě měřit NMN v biologických vzorcích.Může být použit pro budoucí studie o příjmu NMN.
6. Odkaz
Unno, Junya et al. "Absolutní kvantifikace nikotinamidového mononukleotidu v biologických vzorcích pomocí dvojité izotopy zprostředkované kapalinové chromatografie-tandemové hmotnostní spektrometrie (dimeLC-MS/MS)." stárnutí npj sv. 10,1 2. 2. ledna 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Proč si vybrat BONTAC?
BONTAC je lídrem globálního NMN průmysl. Máme první technologii celoenzymové katalýzy v Číně a stali jsme se předním podnikem v oblasti koenzymových produktů, které jsou široce používány ve zdravotnictví, lékařství a kráse, zeleném zemědělství, biomedicíně a dalších oborech. Pozoruhodné je, že BONTAC je NMN dodavatel surovin slavného týmu Davida Sinclaira na Harvardově univerzitě. Naše služby a produkty jsou důvěryhodné. Mimoto BONTAC má nezávislé výzkumné centrum koenzymové inženýrské technologie na provinční úrovni v Číně a vlastní továrny, kde lze zajistit čistotu a stabilitu produktů.
Zřeknutí se
Thje Článek jena základě odkaz vakademický časopis. Relevantní informace jsou poskytnout pouze pro účely sdílení a učení a nepředstavuje žádné lékařské poradenské účely. Pokud dojde k jakémukoli porušení, kontaktAutor proodstranitiont. Názory vyjádřené v tomto článku nereprezentují postoj BONTAC.